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一、组成与结构
HPLC色谱柱主要由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多由不锈钢制成,内壁经过抛光以提高光洁度,减少管壁效应。色谱柱两端装有筛板,防止填料漏出。
二、分类与填料
HPLC色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类,多为直管形。填充柱内填充有固定相,如多孔硅胶、氧化铝、有机聚合物微球等,填料粒度一般为3μm、5μm、7μm、10μm等,这些填料的选择直接影响色谱柱的分离效果和选择性。
三、性能特点
HPLC色谱柱具有高柱效、高选择性、分析速度快等优点。柱效理论值可达数万至数十万理论塔板数/米,对于一般分析,只需数千塔板数的柱效即可满足需求。色谱柱的分离效果取决于固定相的选择和色谱柱的制备及操作条件。
四、应用领域
HPLC色谱柱广泛应用于制药、生物化学、环境监测、食品科学和化学分析等领域。在制药行业,HPLC色谱柱用于药物开发和质量控制,分离和分析药物成分、杂质、代谢产物等;在生物化学领域,用于分离和分析生物样品中的蛋白质、核酸等生物分子。
五、维护与保养
为确保HPLC色谱柱的性能和寿命,需进行正确的维护和保养。使用前后需用适当的溶剂冲洗色谱柱,避免污染和堵塞。长时间不使用时,需用适当的溶剂保存色谱柱,避免干涸和损坏。
HPLC色谱柱
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